リン酸化ペプチド

リン酸化ペプチド |セリン/スレオニン/チロシンの部位特異的リン酸化- |高純度のリン酸化ペプチドの合成 |科学-ペプチド

抗体スクリーニング、キナーゼ分析、タンパク質相互作用に部位特異的リン酸化ペプチドが必要ですか?{0} Science-Peptide は、pSer、pThr、pTyr の複数部位の組み合わせ、高純度、短納期、部位確認をサポートする、プロフェッショナルなリン酸化ペプチド合成サービスを提供します。ようこそお問い合わせください。

タンパク質のリン酸化は最も一般的かつ重要な翻訳後修飾の 1 つであり、細胞周期、シグナル伝達、遺伝子発現など、ほぼすべての生命活動を制御します。{0}リン酸化イベントを研究するには、高品質のリン酸化ペプチドがツールとして必要とされることがよくあります。-、リン酸化特異的抗体のスクリーニングのためであっても、活性分析のためのキナーゼ基質としてであっても、リン酸化ペプチドの純度と精度は実験結果の信頼性に直接影響します。 KPT はペプチド合成における 20 年以上の経験に基づいて、カスタマイズされた部位特異的リン酸化ペプチドを提供します。{6}}単一-部位のリン酸化から複数-部位の組み合わせ修飾まで、研究用量のミリグラムから診断用原料のグラムまで、当社は各リン酸化ペプチドが正確な修飾部位、高いリン酸化効率、バッチ間の安定性を保証します。-}-

リン酸化ペプチドは、リン酸基がペプチド配列内の特定のアミノ酸残基に共有結合している修飾ペプチドです。通常、リン酸化はセリン (Ser)、スレオニン (Thr)、チロシン (Tyr) 残基の水酸基で起こり、ホスホ-セリン (pSer)、ホスホ-スレオニン (pThr) およびホスホ- チロシン (pTyr) を形成します。これらのリン酸化ペプチドは、タンパク質のリン酸化状態を模倣したり、タンパク質の構造や機能に対するリン酸化の影響を研究したり、リン酸化部位を認識する抗体や結合タンパク質をスクリーニングするためのツールとして使用できます。

用途に応じて、リン酸化ペプチドは次のように分類できます。

単一部位リン酸化ペプチド:-1 つの特定の残基のみがリン酸化され、その部位の機能を研究するために使用されます。
マルチサイトリン酸化ペプチド:-複数の残基が同時にリン酸化され、タンパク質の複雑な修飾状態を模倣します。

1. 部位-特異的なリン酸化
当社は、セリン、スレオニン、チロシンの 3 つの残基を持つリン酸化ペプチドの合成をサポートしています。市販の Fmoc- アミノ酸 (ホスホ- 保護)- OH モノマーを使用すると、固相合成中にリン酸化アミノ酸が特定の部位に直接導入され、合成後のランダムなリン酸化の不確実性が回避されます。各リン酸化ペプチドは、リン酸基が正しい位置に結合していることを質量分析により確認した。複数の潜在的なリン酸化部位を含む配列の場合、指定した残基で確実に修飾が行われるようにする保護戦略の設計をお手伝いします。

2. 複数のサイトの組み合わせの変更-
複数のリン酸化部位を必要とする複雑なリン酸化ペプチドの場合、各部位のリン酸化を独立して制御できるように直交保護戦略を採用します。たとえば、当社は顧客向けに pSer と pTyr の両方を含む 13 ペプチドを合成しましたが、両方の部位が漏れなく完全にリン酸化されました。リン酸化部位が互いに隣接していたり​​、合成が難しい領域に位置していても、当社には成熟した最適化ソリューションがあります。

3. 高純度で完全な特性評価
各リン酸化ペプチドは HPLC によって目標純度まで精製され、正しい分子量は質量分析 (MS) によって確認されました。複数のリン酸化部位を含むペプチドについては、フラグメントイオンによる各リン酸化部位の位置を確認するための MS/MS 二次質量分析データを提供します。純度、分子量、質量分析、リン酸化部位の確認、推奨される保管方法を含む詳細な COA レポートが提供されます。

4. 他の改造との互換性
リン酸化ペプチドは、他の修飾 (例、ビオチン、蛍光標識、PEG 化など) と同時に導入できます。たとえば、ビオチン-標識されたリン酸化ペプチドは、リン酸化結合タンパク質を捕捉するためのプルダウン アッセイに使用できます。-蛍光標識されたリン酸化ペプチドは、キナーゼ活性のリアルタイムモニタリングに使用できます。-安定同位体-で標識されたリン酸化ペプチドは、質量分析による定量のための内部標準として使用できます。

1. リン酸-特異的抗体のスクリーニング
リン酸化ペプチドは、リン酸特異的抗体の調製とスクリーニングのための重要なツールです。{0}リン酸化ペプチドを非リン酸化コントロールペプチドと組み合わせてELISAやマイクロアレイスクリーニングに使用することで、リン酸化型のみを認識する抗体を効率的に取得できます。当社は、多くの抗体企業の抗体開発プログラムに高純度のリン酸化ペプチドを提供しており、一部の抗体は人気の研究ツールとなっています。-

2. キナーゼ活性の解析
リン酸化ペプチドは、キナーゼ活性の検出、キナーゼ阻害剤のスクリーニング、またはキナーゼ基質特異性の研究のためのキナーゼ基質として使用できます。たとえば、キナーゼ活性の変化は、標準としてリン酸化ペプチドをホスホ-特異的抗体または放射性標識と組み合わせて使用​​することで定量化できます。当社のリン酸化ペプチドはバッチ間で安定しており、ハイスループット スクリーニングに適しています。-

3. タンパク質相互作用の研究
多くのシグナル伝達経路タンパク質は、特定のリン酸化ペプチドモチーフを認識することによって相互作用します。リン酸化ペプチドをプローブとして使用し、プルダウンまたは SPR 技術と組み合わせることで、新しいリン酸化依存性結合タンパク質を同定できます。-私たちはクライアントのためにリン酸化ペプチドを含む一連の pTyr- を合成し、それらを使用して SH2 ドメインの結合特異性をスクリーニングし、いくつかの新しい相互作用の同定に成功しました。

4. 細胞シグナル伝達経路の研究
リン酸化ペプチドを細胞に導入すると（例えば、マイクロインジェクションまたはリポソームトランスフェクションによって）、特定のシグナル伝達経路の活性化を模倣し、下流の効果を研究することができます。たとえば、リン酸化ペプチドを含む pSer- を使用すると、14-3-3 タンパク質の結合時の機能変化を模倣できます。当社では、細胞実験に直接使用できる細胞透過性ペプチド配列を備えたリン酸化ペプチドを提供できます。

5. 質量分析の定量的内部標準
安定同位体標識リン酸化ペプチドは、質量分析による定量的リン酸化プロテオミクス研究の内部標準として使用できます。当社では、絶対定量用に ¹3C/¹⁵N- 標識アミノ酸を含むリン酸化ペプチドを提供し、天然ペプチドとの共溶出を保証できます。-

6. ワクチンおよび診断薬の開発
特定の疾患状態では、特定のリン酸化ペプチドに対する自己抗体が生成されます。リン酸化ペプチドは、これらの自己抗体を検出し、疾患の診断を支援するための抗原として使用できます。当社は、キット開発用として多くの診断会社にリン酸化ペプチドを供給しており、一部の会社では既に医療機器登録証を取得しています。

1. ニーズの伝達
ペプチド配列、リン酸化部位 (どの Ser/Thr/Tyr がリン酸化されるべきか)、純度要件、および用量を提供します。配列特性に基づいて合成の難易度を評価し、最適なリン酸化戦略（単一部位、複数部位、アナログ選択など）を推奨します。

2. 総合的なデザイン
適切な保護戦略の選択。従来のリン酸化ペプチドの場合、固相合成中に直接導入されたFmoc-Ser(PO(OBzl)OH)-OH、Fmoc-Thr(PO(OBzl)OH)-OH、Fmoc-Tyr(PO(OBzl)OH)-OHなどの市販のモノマーを使用しました。複数の部位がリン酸化されたペプチドの場合、各部位が完全にリン酸化され、副反応が回避されるように反応条件を最適化する必要があります。

3. ペプチド合成
ペプチド鎖は固相合成によって段階的に組み立てられました。{0}保護基を有するリン酸化アミノ酸は、リン酸化が必要な位置に直接結合されました。ホスホリル基の脱落を避けるために、合成プロセス中に反応条件 (カップリング時間や温度など) を厳密に制御しました。長いペプチドまたは不溶性ペプチドの場合、効率を向上させるためにマイクロ波支援合成または特殊な溶媒を使用します。{6}}

4. 切断と脱保護
ペプチドは、側鎖保護基とリン酸保護基の両方を除去するスカベンジャーを含む切断液を使用して樹脂から切断されます。{{0}{1}}酸-に敏感なリン酸化ペプチドの場合、リン酸基の損失を減らすために切断条件（TFA 濃度の低減、スカベンジャーの添加など）を最適化する必要があります。

5. 浄化
粗ペプチドを分取HPLCにより目標純度まで精製した。複数のリン酸化部位を含むペプチドの場合、リン酸化状態が異なる生成物を分離するには、勾配を慎重に最適化する必要がある場合があります。 MSオンラインモニタリングを活用し、対象商品の確実な回収を行っております。

6. 品質管理
HPLC 分析: 純度が要件を満たしていることを確認し、クロマトグラムを提供します。
質量分析 (MS): 分子量が正しいことを確認し、リン酸化が成功したことを確認して、質量スペクトルを提供します。

7. 配送
凍結乾燥粉末と、合成ロット番号、純度、分子量、質量スペクトル、保管条件、使用上の推奨事項を含む詳細な COA レポートを提供します。すべてのデータは、公開またはレポートのために追跡できます。

1. リン酸化に関する豊富な経験
私たちは、単一{0}}部位、複数-部位、天然および非天然類似体を含む数万のリン酸化ペプチドの合成に成功してきました。合成が難しいリン酸化ペプチド（複数の連続したリン酸化部位を含む、疎水性が高い、二次構造が形成されやすいなど）については、当社には成熟した最適化計画があり、成功率は業界平均よりもはるかに高くなります。

2. 柔軟な生産規模
研究用のミリグラム単位から工業用のグラム単位まで安定した量の生産が可能です。長期供給が必要なプロジェクトの場合、バッチ契約を締結してバッチ間の一貫性を確保することができます。--（複数のバッチの HPLC/MS 比較データを提供できます）。当社は数年前から多くの製薬会社のCVによる薬剤スクリーニングプラットフォームとしてリン酸化ペプチドを供給してきました。<5%.

3.迅速な配達
リン酸化ペプチドの定期的な注文 (長さ)<20 aa, single site phosphorylation) can be completed within 12-18 business days. Expedited service can be negotiated to 7-10 working days. For urgent projects, we can coordinate resources for priority arrangement.

4. 専門的な技術サポート
当社のプロジェクト マネージャーは全員ペプチド化学のバックグラウンドを持っており、リン酸化部位の選択、アナログの推奨事項、およびアプリケーションの提案を提供できます。多くのお客様から、当社のアドバイスにより、多くのよくある実験上の落とし穴 (例: 不適切なリン酸化アナログの選択、合成の困難を引き起こす不十分なサイト設計など) を回避することができたと報告されています。

抗体スクリーニング用の単純な単一部位のリン酸化ペプチドが必要な場合でも、シグナル伝達経路研究用の複雑な複数部位の組み合わせペプチドが必要な場合でも、KPT Biotech は常に技術的な専門知識と厳格な姿勢でお客様にサービスを提供する準備ができています。-私たちのチームは、デザインが実験のニーズに完全に一致することを確認するために、プロジェクトの開始前に喜んで相談させていただきます。